Anti-GE pseudorabies viris antikò twous ELISA

Spesifikasyon

PRV-GE AB ELISA

Itilizasyon entansyon: Viris pseudorabies porcine a bloke

Twous deteksyon antikò ELISA se pou detèminasyon an nan antikò GE nan serom kochon an nan viris pseudorabies pork nan vitro. Yo itilize tès la pou yo fè distenksyon ant sovaj ki enfekte

Viris ak vaksinen soti nan vaksinasyon ak GE jèn sipresyon vaksen.

Espesimèn: serom

Materyèl obligatwa men pa bay:

Pirifye dlo

pipetye

96- Oke lektè mikroplat (450Nm)

Revèy

Santrifijez (4000rpm)

Lave machin

Fou (37 degre)

 

Pwosedi tès ak entèpretasyon

Etap 1 Pwosedi Tès

1.1 lave preparasyon solisyon

Wkonsantrasyon orking wAshing likid:Anvan ou itilize, solisyon an lave yo ta dwe retabli nan tanperati chanm (20-25 degre) ak souke respire fè li inifòm. Lè sa a, delye 20 fwa solisyon an lave konsantre ak dlo pirifye (pou egzanp, se 5ml solisyon lave konsantre ajoute nan 95ml dlo pirifye), melanje byen, epi yo ka likid la lave dilye dwe estoke nan 2-8 degre pou 7 jou.

1.2 Preparasyon echantiyon

① Yo te pran san bèt antye, santrifuje nan 4000rpm pou 10 minit, epi yo te kolekte supranant. Serik kapab tou koagule natirèlman san yo pa emoliz.

② Dilye echantiyon serik la 1: 1 (ajoute 70ul echantiyon serik a 70ul echantiyon diluan) ak melanje byen.

Remak: kontwòl negatif ak pozitif pa bezwen dilye.

1.3 Pwosedi Tès

①Take mikroplat etikèt anzim (dapre kantite echantiyon yo, ka demonte epi yo itilize plizyè fwa), ajoute 100ul nan serom dilye a nan etikèt anzim mikroplat, mete de pwi chak pou echantiyon negatif ak pozitif, epi ajoute 100ul chak pou negatif ak kontwòl pozitif nan reyaksyon an byen respektivman. Dousman souke echantiyon an nan pi a, lè l sèvi avèk fim nan plak sele yo kouvri plak la, ak enkubate nan 37 degre pou 60 minit.

Open fim nan plak sele, souke solisyon an nan plak la byen, ajoute 300µl nan travay konsantrasyon lave likid nan chak byen, ak Lè sa a, jete likid la nan pi a. Repete etap ki anwo yo 5 fwa, epi finalman pat sèk sou yon papye pwòp dezenfekte.

③Add 100µl konjige anzim pou chak byen, kouvri plak la, epi enkubate nan 37 degre pou 30 minit.

Open fim nan plak sele, souke solisyon an nan plak la byen, ajoute 300µl nan travay konsantrasyon lave likid nan chak byen, ak Lè sa a, jete likid la nan pi a. Repete etap ki anwo yo 5 fwa, epi finalman pat sèk sou yon papye pwòp dezenfekte.

⑤Add 100µL solisyon substrate nan chak byen, kouvri plak la ak enkubate pou 15 minit nan 37 degre lwen limyè.

⑥Add 50µL solisyon sispann nan chak byen, epi detèmine rezilta a nan 5 minit.

Etap 2 Rezilta Entèpretasyon

Valè a OD450 nan chak byen te li sou 96- byen lektè a microplate.

2.1 Validasyon

The average OD450nm value of negative control was ≥ 0.5 and the blocking rate of positive control was >50%, rezilta eksperimantal yo te valab. Sinon, tès la ta dwe repete.

2.2 Metòd Kalkil

Pou chak echantiyon, kalkile PI a (Blockingr manje) jan sa a lè l sèvi avèk echantiyon an korije ak valè kontwòl:

2.3 Entèpretasyon Rezilta

Lè pi <40%, li jije kòm negatif.

Lè pi> 50%, li jije kòm pozitif.

Lè 40% mwens pase oswa egal a PI mwens pase oswa egal a 50%, li se jije kòm sispèk, ak sijere yo repete pran echantiyon ak tès yon semèn pita.

Baj popilè: Anti-GE Porcine pseudorabies viris antikò ELISA twous, Lachin anti-GE pseudorabies viris antikò ELISA Twous Swèd, manifaktirè, faktori